INGENIERIE GENOMIQUE – LA TECHNIQUE DU CRISPR – CAS9

Introduction :

• Rappel des Techniques de Transgénèse & Ingénierie Génomique
• Origine et principe de la technologie CRISPR/CAS9
• Rappel des techniques de clonage moléculaire

Mise en œuvre de la technique :

• Paramètres définissant l’efficacité et la spécificité de CRISPR/Cas9
• Prédiction informatique des ARN guides
• Stratégies de conception d’un repair template
• Les méthodes de sélection
• Prise en compte des mutations imprévues « off-target »
• Les limites de la  technique

Applications système eucaryote ou procaryote

•  Etudes de cas / Travaux dirigés
• Design d’une stratégie de knock-out (sans repair template, NHEJ)
• Design d’une stratégie de knock-out (avec repair template, HDR)
• Design d’une stratégie de knock-in
• Choix d’une méthode de sélection